第十九章 掉链子-第2/3页



    “这是抗性筛选,接过种了,并且经过了培养,但是,细胞没长出来!”听秦雅的声音都快哭了,扶着平板盒的手已经有些发颤。

    “都没长出来吗?”林萧然有些不敢相信,再次从中抽出两只平板进行观察,眼前仍是一片清亮,哪有半点细胞生长的迹象?

    “没有,抗性筛选没有成功,意味着……,转染可能失败了!”秦雅的声音中已经开始呜咽,显得极其难过,忙碌了近两周,现在却颗粒无收。

    所谓的细胞转染,是将构建的质粒,也就是遗传物质,通过物理手段导入细胞核,在细胞发生分裂的时候,有一定机率整合进入主基因序列,接下来,该细胞拥有质粒赋予的生理功能,对于当前实验来说,可以就是复制目标蛋白,并且显示遗传标记!

    在此过程中,真正发生转染的细胞数量极低,绝大多数并未发生转染,我们如何将完成转染的细胞挑选出来呢?

    我们挑选转染细胞株的手段,就是通过遗传标记,只要细胞发生了转染,遗传标记就会发生作用,表现出一定的生理特征,通过这一生理特征,可以方便地将转染细胞挑选出来。

    美津在质粒中加入的遗传标记有两个,其一是抗性标记,只要转染成功,细胞将对特定的抗生素具有抗性,如果我们在培养基内添加该抗生素,细胞依旧可以生长,说明很有可能是转染株,直接挑出即可;另一个遗传标记是营养缺陷,在细胞转染中,使用得最多的是二氢叶酸缺陷型,只要培养基没有添加二氢叶酸,细胞便不会正常生长!

    实验中,两种标记可以同时筛选,也可以分步操作,结果殊途同归,当然,同时筛选的效率更高,但需要更加丰富的实验经验。

    秦雅经验不足,采用了分步操作方式,即使这样,仍然没有筛选成功。

    在抗生素环境中,没有细胞正常生长,说明没有出现该遗传标记的生理特征,质粒没有被整合进主基因序列,转染环节出现了问题!

    “做过镜检吗?”林萧然也意识到了问题的严重性,他沉声问道。

    “做了,能检出细胞,但细胞的数量太少,说明生长受到了极大的抑制,你说……,现在怎么办啊!”秦雅说话间,都快哭出声了。

    啧……,林萧然当然知道转染出现了问题,这种操作,对于不是十分专业的团队来说,确实难度很高,但对于美津而言,就不应该了。

    转染操作说起来高深,在拥有先进的转染设备后,也就是那么回事儿,想失误都难,秦雅在这里都能出错,也真是没谁了!

    美津的转染设备是比较先进的激光脉冲转染仪,它发射一种高频激光脉冲,可以击穿细胞膜与细胞核膜,形成物理通道,质粒就有机会通过该通道进入细胞核,在随后的细胞分裂中,有机会被整合进入主基因序列。

    这一过程是不可见的,一切都要凭感觉,但只要运气不是太差,基本不可能失误!

    林萧然忽然有种骂人的冲动,心说为了拿到质粒,我费了多少心思啊,可你却在转染环节掉了链子,你不是名牌大学毕业生嘛,不是一直有优越感嘛,为什么实际操作如此不堪!

    想骂归想骂,脸上却不能有任何表露,对方已经受到了沉重地打击,如果再说一些重话,恐怕就要崩溃了,唉!

    稳定了一下心神,林萧然脸上挤出一点微笑,宽慰说道,“我也认为转染出现了问题,重新做一次吧,不是什么大事。”

    说罢,他再次清理了一下思绪,让对方看起来风轻云淡,并没有因为低级失误,有特别表现。...
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